HPLC5 Waters HPLC (1) Dry Prime Dry Prime : 이동상을 교체하거나, 이동상 라인에 기포가 차있을 때, 건식 프라임 옵션을 사용하여 시스템을 프라이밍해준다. 1) Waters HPLC 기본 창에서, 'Direct Function'을 눌러준다. 2) Direct Functions 에서 ' 1. Dry Prime'를 눌러준다. 3) 교체된 이동상 라인 또는 기포를 없애고 싶은 이동상 라인을 눌러wnrh Dry Prime 시간을 설정한다. ex) A라인 이동상 교체 후 5min 입력 → Open A → Continue 4) Prime/ Vent valve을 열어, 빈 주사기를 이용하여 기포를 빼준다. 5) Dry Prime 시간이 끝나거나, 기포가 발생되지 않으면 Prime/ Vent valve를 잠가준다. 2023. 7. 19. Waters HPLC (2) Check Valve Cartridge 교체 Check Valve Cartridge 교체 [ Required Materials ] • Wrench, 1/2-inch, open-end • Wrench, 5/16-inch, open-end • Replacement check valve cartridge • Squirt bottle with 100% alcohol (methanol or isopropanol) • Syringe (in Startup Kit) 1) 1/2인치 렌치를 사용하여 Check Valve Housing을 mainfold에서 분리한다. 2) Check Valve Housing을 뒤집어서 기존체크 밸브를 탈거한다. 3) Inlet Check valve Housing을 확인검사하고 필요한 경우 100% 에탄올로 세척해준다. .. 2023. 7. 19. HPLC Column 세척 및 보관법 HPLC Column 세척 및 재생법 * Normal phase column ( 컬럼 부피의 10배 ) -MeOH-Metylene Chloride-Heptane (Isooctane) * Reverse phase column ( 컬럼 부피의 10배 ) -물, 메탄올, 아세토나이트릴 사용: 메탄올보다 아세토나이트릴이 더 좋음 -일반적으로 물:CH3CN = 60:40, 유속 0.2mL/min 로 3~4시간 세척한다. -비휘발성(인산계통)salt 사용시: 유기용매 함량이 10% 이상 함유하도록하여 장시간의 세척이 꼭 필요! Salt 제거 후 CH3CN의 비율을 높여 (또는 CH3CN 100%) 컬럼 내 잔류물을 세척한다. HPLC Column 의 보관 * 충진제와 반응하지 않는 용매로 채워 보관 * .. 2023. 7. 17. 크로마토그래피(chromatography) 크로마토그래피(chromatography) 크로마토그래피란? 혼합된 각 성분들이 고정상과 이동상 사이에서 서로 다른 분포평형을 이루어 단일 성분으로 분리하는 것을 연구하는 학문. 혼합물 → 컬럼 → 검출 * 이동상 : 시료 성분을 주입구에서 검출기까지 이동시켜주는 역할, 분석시 시료 성분들 간의 분리정도에 영향을 준다. * 고정상(컬럼) : 컬럼 내 충진 된 물질, 충진제 01) Peak : peak는 raw data point 갯수가 작아지면 작아질수록 data가 왜곡되고 RT도 달라질 수 있다. ( 최소 10point / Opt. 20 points 이상 ) 02) Peak width / tailing / broadening 원인: 확산현상 또는 주입구와 컬럼의 활성부분 오염 Fronting.. 2023. 7. 3. 이전 1 2 다음 반응형
